一、載玻片和蓋玻片的處理 將載玻片或培養(yǎng)用的小蓋片浸泡在重鉻酸鉀濃硫酸清潔液中24小時,然后流水充分沖洗,再用蒸餾水沖洗3遍以上,而后置95%乙醇中12小時。取出擦干或烤干,貯放于玻片盒內(nèi)備用。蓋玻片很薄,以上處理程序必須縮短時間,清潔液浸泡只需2小時,流水沖洗注意勿損傷玻片。
二、黏附劑的使用 1.多聚左旋賴氨酸(poly-1—lysine) 首先配制0.1%(ω/υ)多聚左旋賴氨酸濃縮液,室溫下(18~26℃)可保存1年。使用時,將試劑10倍稀釋成工作液,濃度為0.01%(ω/υ),2—8℃冰箱保存,有效期3個月。使用方法是將充分洗凈和預(yù)先干燥的玻片浸泡于稀釋后的多聚左旋賴氨酸溶液數(shù)十秒或提拉十次,瀝干.于室溫下晾干12—24小時或在45℃以下烤箱內(nèi)烘干。處理后的玻片避光干燥可保存三個月。 2.APES(3—氨丙基—乙氧基甲硅烷) APES必須現(xiàn)用現(xiàn)配。用此方法黏合的玻片應(yīng)垂直烤片而不能水平烤片,否則,組織片中易出現(xiàn)氣泡。 APES的使用方法:用丙酮50倍稀釋(APESl份、丙酮49份混合),將洗凈的玻片放人稀釋好的APES中,停留20~30秒,取出稍停,再人純丙酮或蒸餾水中涮去未結(jié)合的APES。置通風(fēng)櫥中晾干即可。注意用APES防脫片處理的載玻片撈片時組織應(yīng)一步到位.并盡量減少氣泡存在,以免影響染色結(jié)果。注意不要將APES與其他防脫載玻片劑混合使用。
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